Evaluación de la eficacia de tiras de ácido oxálico (Calistrip® Biox) contra Varroa destructor en condiciones de presencia y ausencia de cría

INVESTIGACIÓN

Tiras de Calistrip. Foto: Calier.

Apicultura y Miel publica este artículo de investigación sobre la eficacia de Calistrip, producto antivarroa de los laboratorios Calier. Por su interés, consideramos útil su difusión. No es un artículo sometido a revisión por pares.

Resumen

El presente estudio se realizó con la finalidad de evaluar la eficacia de un nuevo medicamento orgánico formulado a base de ácido oxálico en forma de tiras para colmenas (Calistrip® Biox, Laboratorios Calier, S.A.) para el tratamiento de Varroa destructor. La eficacia y seguridad deltratamiento se evaluó en condiciones de presencia y ausencia de cría (primavera) y en condiciones de baja presencia de cría (finales de otoño/principios de invierno). El tratamiento consistió en 2 aplicaciones de 2 tiras por colmena separadas por un intervalo de 21 días (6,44 g ácido oxálico/tira) durante un período total de tratamiento de 6 semanas. En condiciones de ausencia de cría, se registraron valores de eficacia muy elevados, cercanos al 90%, mientras que, en presencia de cría, la eficacia fue de alrededor del 70-75%. Los resultados de eficacia obtenidos en presencia de cría se consideran muy satisfactorios en comparación a otros tratamientos teniendo en cuenta que no son las condiciones óptimas para los tratamientos frente a Varroa. No se registraron efectos adversos ni aumentos de mortalidad atribuibles al producto.

Palabras clave

Varroa destructor, ácido oxálico, eficacia, abejas.

1 – Introducción

El ácido oxálico es una de las sustancias orgánicas más utilizadas para el tratamiento de Varroa destructor, ya que presenta una elevada eficacia y un bajo riesgo para la colmena y los productos apícolas(1).

2 – Materiales y métodos

Tratamiento experimental

El tratamiento experimental consistió en el medicamento veterinario Calistrip® Biox, registrado en España y en diferentes países de la Unión Europea. Calistrip® Biox consiste en tiras de ácido oxálico (6,44 g ácido oxálico dihidrato/tira) y está indicado para el tratamiento de las parasitosis externas en abejas causadas por Varroa destructor, mediante la siguiente posología: dos tiras por colmena (es decir, 12,88 g de ácido oxálico por colmena) y las tiras deben retirarse después de 6 semanas.

El presente estudio fue realizado durante el desarrollo del medicamento veterinario y, por ello, la posología utilizada fue diferente a la indicada en la Ficha Técnica actualmente autorizada para el producto. El estudio se realizó administrando dos tiras por colmena en dos tratamientos consecutivos de 3 semanas (2 tiras/colmena/tratamiento). Sin embargo, las observaciones realizadas tras las 3 semanas de tratamiento confirmaron que las tiras contenían suficiente cantidad de producto para continuar con el tratamiento pasadas las 3 primeras semanas.

Apiario experimental y climatología

Los ensayos se realizaron en un apiario experimental en las proximidades de Montroi (Valencia, España). La localidad de Montroi tiene un clima templado con verano seco y suave según la clasificación de Köppen-Geiger. Los experimentos fueron realizados en diferentes épocas del año. El experimento 1, cuyo objetivo fue evaluar la eficacia de Calistrip® Biox en condiciones de elevada presencia y en ausencia de cría, se inició en marzo de 2021. El experimento 2, cuyo objetivo fue evaluar la eficacia del producto en condiciones de baja presencia de cría, se inició en diciembre de 2021. En la siguiente tabla, se muestran las temperaturas registradas durante los meses de realización de los estudios:

En el experimento 1, la población de estudio consistió en un total de 12 colmenas tratadas con Calistrip® Biox y divididas en dos grupos: el grupo 1 consistió en 8 colmenas Langstroth con elevada presencia de cría, mientras que el grupo 2 consistió en 4 colmenas Dadant con ausencia de cría. La ausencia de cría en el grupo 2 se indujo mediante la sustitución de reinas antes del inicio del ensayo.
En el experimento 2, la población de estudio consistió en un total de 15 colmenas divididas en dos grupos: el grupo 3 consistió en 7 colmenas Langstroth con baja presencia de cría (grupo control negativo, sin tratar), mientras que el grupo 4 consistió en 8 colmenas Langstroth con baja presencia de cría (grupo tratado con Calistrip® Biox).

Las colmenas experimentales dispusieron de un fondo sanitario en el cual se colocaron láminas de cartulina cuadriculada impregnadas de vaselina filante utilizadas para realizar el conteo periódico de ácaros de Varroa4,5,6. Adicionalmente, para estudiar la mortalidad asociada al tratamiento, se colocaron jaulas de mortalidad en colmenas representativas (en el experimento 1, se colocaron en cuatro colmenas del grupo 1, y en el experimento 2, se colocaron en tres colmenas del grupo 3 y en tres colmenas del grupo 4). Las jaulas de mortalidad se colocaron por debajo de la piquera de cada colmena con la finalidad de recoger las abejas muertas extraídas por las abejas limpiadoras.

Antes del inicio de los tratamientos, todas las colmenas fueron revisadas para asegurar que cumplían los requisitos de pre-inclusión respecto a la presencia o ausencia de cría, presencia de reina, población viable de abejas y nivel de parasitación inicial de ácaros de Varroa (entre 300 y 3000 ácaros). La mortalidad natural previa de ácaros se estimó mediante el seguimiento durante dos semanas antes de iniciar los tratamientos6. Las colmenas incluidas en el estudio no se trataron con ningún tratamiento antiparasitario en los 6 meses previos.

3 – Tratamiento con Calistrip

Las colmenas de los grupos de tratamiento (grupos 1 y 2 del experimento 1 y grupo 4 del experimento 2) fueron tratadas con 6,44 g de ácido oxálico/tira (Calistrip® Biox, 4306 ESP, Laboratorios Calier, S.A.) y 2 tiras/colmena. Las tiras se colocaron suspendidas dentro de cada colmena, donde las abejas mostraban mayor movilidad y con acceso libre a ambos lados de la tira. En el experimento 1, el tratamiento se inició el 10 y 11 de marzo de 2021 en los grupos 1 y 2, respectivamente, y en el experimento 2, el tratamiento se inició el 9 de diciembre de 2021 en el grupo 4. En todos los grupos de tratamiento, las tiras se mantuvieron en las colmenas durante un período de tres semanas. Pasadas las tres semanas, las tiras se retiraron y se colocaron 2 nuevas tiras de tratamiento y se mantuvieron durante un período de tres semanas adicionales.

Evaluación de la eficacia del tratamiento

La eficacia de Calistrip® Biox se basó en la evaluación de la mortalidad de ácaros de Varroa destructor como parámetro primario. La mortalidad de los ácaros se determinó a intervalos regulares durante y después del tratamiento. El primer control se realizó a las 24 horas del inicio del tratamiento y, a continuación, con una regularidad de 3-4 días hasta el final del tratamiento con ácido oxálico y hasta el final del tratamiento de contraste. La eficacia del tratamiento en cada grupo se determinó en función del porcentaje de reducción de ácaros, calculado al final del tratamiento experimental y del tratamiento de contraste, según la siguiente ecuación:

Evaluación de la seguridad del tratamiento

Para evaluar la seguridad del tratamiento, se evaluó la mortalidad de las abejas adultas como parámetro primario. Se realizaron conteos periódicos de mortalidad en las jaulas de mortalidad instaladas para este propósito. Adicionalmente, las colmenas se monitorearon durante todo el período de estudio para detectar posibles efectos adversos debidos al tratamiento y documentar la salud general de las abejas.

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4 – Resultados

Estado de las colmenas experimentales durante el ensayo:

Experimento 1: al inicio del ensayo, las colmenas del grupo 1 presentaron una elevada presencia de cría, acorde con la época del año de realización del estudio. Las colmenas nº5, 6, 8 y 9 presentaron entre 4 y 5 panales de cría, mientras que las colmenas nº 2, 3, 4 y 10 presentaron entre 6 y 7 panales de cría.

Al finalizar el tratamiento con ácido oxálico (D42), todas las colmenas experimentaron un repunte en la superficie de cría y una ligera pérdida de población de abejas, más patente en las colmenas del grupo control no tratadas y, por lo tanto, con mayor carga de Varroa. En el siguiente control (D67), las reinas fueron liberadas tras el enjaulado y, por lo tanto, todas las colmenas presentaron ausencia total de cría. Bajo estas circunstancias, la población de abejas creció sensiblemente.

Al final del ensayo (D83) todas las reinas recuperaron la actividad de puesta y las colmenas presentaron cría operculada. Debido a la interrupción impuesta por el enjaulado, se hizo patente la caída de la población de abejas. Esta caída fue más acusada en el grupo control, debido a los efectos de la parasitación por Varroa.

En el grupo de tratamiento, sólo se produjo la baja de la colmena nº12, que se consideró inviable a partir del día 67 del ensayo. El resto de las colmenas se mantuvieron viables hasta el final del ensayo.

Mortalidad de las abejas adultas y efectos adversos

Experimento 1: la mortalidad de abejas adultas registradas fue el esperado de acuerdo con el umbral de mortalidad natural de alrededor de 20 abejas por día en períodos de actividad básica, aumentando hasta 50-60 abejas por día en situaciones de elevada actividad y población de abejas adultas y cría. En el estudio, se observaron repuntes de mortalidad, con valores de mortalidad alrededor de los 50-60 individuos por día atribuibles a la manipulación de las colmenas (colocación de las tiras de ácido oxálico) y de alrededor de 80 abejas por día en los momentos de máximos poblacionales, coincidiendo con el aumento de la actividad de pecoreo. No se detectaron efectos adversos significativos ni aumento de mortalidad atribuible al tratamiento con ácido oxálico, aunque no hay que descartar que el oxálico pueda provocar cierta mortalidad de abejas. Como suele ocurrir en los tratamientos contra Varroa basados en tiras suspendidas entre los panales de cría, las abejas retiraron la cría en la proximidad de las tiras, efecto que se constató en el momento de su retirada. Tampoco se observaron alteraciones en el comportamiento social de las colonias o en la actividad de vuelo de las abejas, que fue acorde a la época del año en la que se realizó el ensayo.

Experimento 2: no se observaron diferencias significativas de mortalidad de abejas adultas entre el grupo control y el grupo de tratamiento, por lo que se puede concluir que el tratamiento con ácido oxálico no tiene efectos sobre la mortalidad de abejas.
El perfil de mortalidad observado en ambos grupos fue muy similar, observándose repuntes puntuales debidos a la manipulación de las colmenas en el grupo de tratamiento coincidiendo con la administración de las tiras de ácido oxálico (entre 30 y 45 individuos por día) y en los grupos de tratamiento y control coincidiendo con el enjaulado de las reinas (entre 40 y 50 abejas por día en ambos grupos de tratamiento).
Adicionalmente, a partir del día 46, la mortalidad registrada en el grupo control fue claramente superior a la del grupo de tratamiento, muy probablemente debido a los efectos de la parasitación por Varroa. La mortalidad diaria de abejas en las colmenas con elevada parasitación por Varroa puede llegar a doblar los valores observados en colmenas sanas. Tampoco se detectaron efectos tóxicos derivados del ácido oxálico sobre la cría, ni alteraciones en el comportamiento social de las colonias o en la actividad de vuelo de las abejas, que fue el adecuado para la época del año en la que se realizó el ensayo.

Mortalidad de ácaros

Experimento 1: en las Tablas 6 y 7 se muestran las mortalidades de ácaros registradas en las colmenas de los grupos 1 y 2, respectivamente. La eficacia media del tratamiento (expresada como mortalidad de ácaros según la ecuación nº1), fue del 74,1 ± 12,93% en el grupo 1 (colmenas tratadas con elevada presencia de cría) y del 86,9 ± 8,29% en el grupo 2 (colmenas tratadas con ausencia de cría). No se detectaron diferencias estadísticamente significativas entre la eficacia media calculada en presencia de cría respecto al tratamiento realizado en ausencia de cría (p>0,05).

En las figuras 1 y 2 se muestra la mortalidad de ácaros acumulada del grupo 1: la figura 1 muestra la mortalidad de ácaros acumulada del grupo 1-A (representado por las colmenas nº 5, 6, 8 y 9, con presencia de entre 4 y 5 panales de cría al inicio del ensayo) y la figura 2 muestra la mortalidad de ácaros acumulada del grupo 1-B (representado por las colmenas nº2, 3, 4 y 10, con presencia de entre 6 y 7 panales de cría al inicio del ensayo). La figura 3 muestra la mortalidad de ácaros acumulada en el grupo 2 (colmenas con ausencia de cría).

En la colmena nº9, puede observarse como la mortalidad acumulada aumenta de forma exponencial a partir de la segunda aplicación del tratamiento, siendo el perfil de mortalidad observado similar al del grupo 2 (colmenas con ausencia de cría). En efecto, la inspección de la colmena nº9, demostró que se había producido una situación de ausencia de cría durante la segunda aplicación del tratamiento debido a una sustitución natural de la reina. En la colmena nº10, en cambio, se registró una eficacia anormalmente baja. En esta colmena, se observó una presencia de cría de zánganos significativamente superior durante gran parte del tratamiento. Debido a esto, los resultados de la colmena nº10 se excluyeron del cálculo de eficacia.

En la Figura 3, se muestra la mortalidad de ácaros acumulada del grupo 2 (colmenas con ausencia de cría).

Como puede observarse, la tendencia de las curvas es similar en todas las colmenas y se observa un perfil de mortalidad exponencial. En este grupo, se produjo una caída intensa de ácaros durante los primeros 21 días de tratamiento, debido a que todos los ácaros se encontraban en fase forética y, por lo tanto, accesibles al tratamiento con ácido oxálico.

Experimento 2

En las Tablas 8 y 9 se muestran las mortalidades de ácaros registradas en las colmenas de los grupos 3 (grupo control negativo) y 4 (grupo de tratamiento), respectivamente, con baja presencia de cría en ambos casos. La eficacia media del tratamiento (expresada como mortalidad de ácaros según la ecuación 1), fue del 24,7 ± 15,99% en el grupo 3 y de 73,1±17,83% en el grupo 4. La eficacia media calculada entre ambos grupos mostró diferencias estadísticamente significativas (p<0,05).

En el grupo de tratamiento, puede observarse cómo el perfil de mortalidad de ácaros tiene una tendencia exponencial invertida. Esta tendencia se muestra de forma muy acusada en la colmena nº15: en esta colmena se produjo una renovación reciente de reina antes del tratamiento, por lo que las primeras tiras de ácido oxálico actuaron en ausencia de cría, provocando una mortalidad muy acusada de Varroa durante las tres primeras semanas del tratamiento. En el resto de las colmenas, la mortalidad acumulada durante los primeros 21 días superó ligeramente el 50%, duplicándose prácticamente la mortalidad con el segundo tratamiento con ácido oxálico.

Evaluación estadística

Los datos de mortalidad de Varroa recopilados de los grupos de tratamiento y grupo control en el experimento 1 y 2 se analizaron mediante pruebas estadísticas no paramétricas para realizar las comparaciones entre grupos (Software R, versión 4.4.1). El análisis de eficacia entre los grupos tratados en situación de ausencia de cría, baja presencia de cría y elevada presencia de cría fue realizado mediante la prueba de Kruskal Wallis. El análisis de eficacia entre el grupo control no tratado y el grupo tratado en otoño se realizó mediante la prueba de Mann-Whitney. Los efectos se consideraron significativos con un nivel de error del 5% (p = 0,05) o inferior.

5 – Discusión

El aumento de mortalidad de ácaros registrada tras el tratamiento con Calistrip® Biox demuestra el efecto acaricida del producto tanto en ausencia como en presencia de cría.

En condiciones de presencia de cría operculada, los tratamientos basados en el goteo de jarabes de ácido oxálico ofrecen eficacias que no superan el 30 o 40%2,12. Del mismo modo, la eficacia reportada para ciertos acaricidas de síntesis, como los piretroides y los organofosforados, es también inferior a la obtenida en el presente estudio, debido a los crecientes problemas de resistencias asociados a ciertos principios activos. Hay que destacar, que en las colmenas en las que se indujo ausencia de cría (grupo 2), se registraron eficacias muy elevadas, cercanas al 90%. No se detectaron diferencias estadísticamente significativas entre la eficacia media calculada en presencia de cría respecto al tratamiento realizado en ausencia de cría (p>0,05).

Colocación de las tiras. Foto: Calier.

Considerando los resultados obtenidos en ambos experimentos, se demuestra que el tratamiento con Calistrip® Biox en ausencia de cría presenta una eficacia muy elevada (cercana al 90%). En condiciones de elevada presencia de cría, la eficacia registrada fue inferior (70-75%). Sin embargo, hay que tener en cuenta que, en estas condiciones, las colmenas iniciaron el ensayo con un gran número de cuadros de cría (hasta 7 cuadros de cría).
Aun así, la eficacia obtenida fue muy superior a la eficacia reportada para otros acaricidas orgánicos en condiciones de presencia de cría. Los resultados de eficacia obtenidos en ambos experimentos muestran que no existen diferencias estadísticamente significativas en la eficacia obtenida en el grupo tratado en ausencia de cría, en comparación a la eficacia obtenida en los grupos tratados con elevada o baja presencia de cría (p>0.05).

Abeja parasitada por ácaros de varroa.

Como se ha demostrado, la matriz semisólida con ácido oxálico de Calistrip® Biox ayuda a mantener una concentración adecuada de ácido oxálico en la colmena durante la duración total del tratamiento, asegurando el contacto con los ácaros foréticos que emergen de las celdas de cría y un efecto acaricida más persistente que otros acaricidas orgánicos.

Adicionalmente, no se reportaron efectos adversos para las abejas adultas ni la cría, ni aumentos de mortalidad debidos al tratamiento. La liberación lenta del ácido oxálico de las tiras de Calistrip® Biox ha demostrado generar una menor toxicidad para las abejas al evitar exponerlas a una dosis elevada de ácido oxálico en un periodo corto de tiempo, como puede suceder con otros métodos de administración como el goteo o la vaporización1.

6 – Conclusiones del uso de Calistrip

En base a estos resultados, puede concluirse que el tratamiento con Calistrip® Biox es eficaz y seguro para el tratamiento de Varroa destructor y es una buena alternativa a incorporar dentro de los planes de tratamiento contra Varroa, mostrando eficacias superiores tanto en ausencia como en presencia de cría, en comparación a otros acaricidas orgánicos.

4 – Bibliografía empleada

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AUTORES.
Calatayud Tortosa, Fernando. (fernan_cal@apiads.es).
Simó Zaragoza, Enrique (enrisimo@apiads.es). Agrupación de Defensa Sanitaria APIADS. C/ Raval, 75b 46193 Montroi (València).
Bravo Centelles, Nídia (nbravo@calier.es). Laboratorios Calier, S.A. Carrer Barcelonès, 26, 08520 Barcelona (España).

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